DISEÑO DE PRIMER´S La reacción en cadena de la polimerasa tiene muchas aplicaciones en biología, medicina y biotecnología. Todas estas aplicaciones dependen del empleo de parejas de cebadores o primers, oligonucleótidos que sirven de puntos de arranque de...
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DISEÑO DE PRIMER´S La reacción en cadena de la polimerasa tiene muchas aplicaciones en biología, medicina y biotecnología. Todas estas aplicaciones dependen del empleo de parejas de cebadores o primers, oligonucleótidos que sirven de puntos de arranque de la actividad polimerasa. En concreto, la extensión de los cebadores se da en su extremo 3'. Por estas razones es deseable que los cebadores usados en una PCR cumplan ciertas condiciones, todas ellas calculables desde su secuencia: deben tener longitudes de entre 19 y 25 nucleótidos deben ser ricos en contenido en GC el contenido en GC de los cebadores de la misma reacción debe ser similar deben ser complementarios a las regiones deseadas, aunque admiten degeneraciones las temperaturas de fusión de los primers usados en la misma reacción deben ser similares, normalmente es requisito que las secuencias de los cebadores no formen horquillas internas ni sean complementarias entre sí. Cuando el objetivo a amplificar es un locus
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